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          PCR在臨床中的運(yùn)用(一)

          發(fā)布時(shí)間: 2009-07-28  點(diǎn)擊次數(shù): 3725次

          PCR技術(shù)結(jié)核菌檢測(cè)中的應(yīng)用

           結(jié)核菌基因診斷的意義主要表現(xiàn)在:1. 區(qū)分TB與其它分枝桿菌;2. 檢測(cè)TB耐藥基因;3. 提高TB的陽(yáng)性檢出率。

           PCR技術(shù)在HBV檢測(cè)中的應(yīng)用

          1、 了解乙肝病毒在體內(nèi)存在的數(shù)量。
          2、 是否傳染,傳染性有多強(qiáng)。
          3、 是否復(fù)制。
          4、 是否有必要服藥。
          5、 肝功能異常改變是否由病毒引起。
          6、 判斷病人是適合用哪類抗病毒藥物。
          7、 判斷藥物治療的療效。

           PCR技術(shù)在HCV檢測(cè)中的應(yīng)用

          HCV是引起輸血后肝炎的主要致病因子,因其在血中的含量極低,僅為HBV的1%,其免疫學(xué)標(biāo)志只有抗-HCV一項(xiàng),且至今病毒分離尚未成功,所以HCV的檢測(cè)較HBV困難的多,因此,PCR技術(shù)在HCV的檢測(cè)出顯得格外重要,其意義主要表現(xiàn)在:
          1、抗-HCV可作為HCV感染診斷的指標(biāo)。由于個(gè)體間免疫功能的差異,部分患者出現(xiàn)抗-HCV較晚,免疫功能低下者和經(jīng)免疫抑制治療者甚至可能不產(chǎn)生抗-HCV;因此HCV-RNA是HCV感染的確診標(biāo)志。據(jù)報(bào)道,在患者發(fā)病30-60天和6-30個(gè)ELISA抗-HCV的檢出率分別為45%和67%,說(shuō)明ELISA檢出抗-HCV有相當(dāng)高的漏檢率。
          2、在“窗口期”沒有抗-HCV產(chǎn)生,但可檢測(cè)出RNA。
          3、HCV-RNA定量可指導(dǎo)用藥,為療效觀察及預(yù)后判斷提供客觀指標(biāo)。血清HCV拷貝高對(duì)干擾素不敏感,低敏感,據(jù)報(bào)道,HCV<100pg/ml組:11/30轉(zhuǎn)陰HCV>100pg/ml組:1/30轉(zhuǎn)陰。
          HCV-RNA持續(xù)維持高水平狀態(tài)可能預(yù)后不佳。
          4、抗-HCV陽(yáng)性并不能代表現(xiàn)癥感染,丙型肝炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)是HCV-RNA(+).

           PCR在CT檢測(cè)中的應(yīng)用
           
          CT是非淋菌性尿道炎的主要病原微生物之一,有時(shí)還可引起不育等其它疾病。CT為專性細(xì)胞寄生性,一般培養(yǎng)不能生長(zhǎng),只有在活細(xì)胞內(nèi)才能增殖復(fù)制,實(shí)驗(yàn)室通過(guò)Mcloy、Hela-229細(xì)胞培養(yǎng)觀察包涵體,可認(rèn)為是診斷“金標(biāo)法”。但因操作復(fù)雜,技術(shù)要求高,需時(shí)間長(zhǎng),并不適于臨床檢測(cè)。免疫學(xué)方法有直接免疫熒光法、EIA法等,但這兩種方法無(wú)論是檢測(cè)抗原還是抗體陽(yáng)性率均不足50%,用單抗會(huì)丟失位點(diǎn)、多抗有交叉反應(yīng),在高危人群篩查中常與金葡萄球菌、鏈球菌、淋球菌等發(fā)生交叉反應(yīng)使其特異性受到影響,因此,國(guó)內(nèi)外專家一致認(rèn)為CT的基因診斷方法應(yīng)定為“金標(biāo)準(zhǔn)”。
           


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